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同位素標(biāo)記法證明dna復(fù)制為半保留性

2024-7-4 13:04| 發(fā)布者: 疤痕修復(fù)| 查看: 413| 評(píng)論: 0|原作者: 疤痕修復(fù)|來(lái)自: 本站

摘要: 今天給各位分享同位素標(biāo)記法證明dna復(fù)制為半保留性的知識(shí),其中也會(huì)對(duì)怎樣用實(shí)驗(yàn)原理來(lái)證明dna是半保留復(fù)制進(jìn)行解釋?zhuān)绻芘銮山鉀Q你現(xiàn)在面臨的問(wèn)題,別忘了關(guān)注本站,現(xiàn)在開(kāi)始吧!一、如何證明生物的DNA復(fù)制方式 ...

同位素標(biāo)記法證明dna復(fù)制為半保留性[tag]

今天給各位分享同位素標(biāo)記法證明dna復(fù)制為半保留性的知識(shí),其中也會(huì)對(duì)怎樣用實(shí)驗(yàn)原理來(lái)證明dna是半保留復(fù)制進(jìn)行解釋?zhuān)绻芘銮山鉀Q你現(xiàn)在面臨的問(wèn)題,別忘了關(guān)注本站,現(xiàn)在開(kāi)始吧!

一、如何證明生物的DNA復(fù)制方式是半保留復(fù)制

有關(guān)雙鏈DNA(1、2鏈)與mRNA(3鏈)的堿基計(jì)算:

①DNA單、雙鏈配對(duì)堿基關(guān)系:A1=T2,T1=A2;A=T=A1+A2=T1+T2,C=G=C1+C2=G1+G2.A+C=G+T=A+G=C+T=1/2(A+G+C+T);(A+G)%=(C+T)%=(A+C)%=(G+T)%=50%;(雙鏈DNA兩個(gè)特征:嘌呤堿基總數(shù)=嘧啶堿基總數(shù))

DNA單、雙鏈堿基含量計(jì)算:(A+T)%+(C+G)%=1;(C+G)%=1―(A+T)%=2C%=2G%=1―2A%=1―2T%;(A1+T1)%=1―(C1+G1)%;(A2+T2)%

②DNA單鏈之間堿基數(shù)目關(guān)系:A1+T1+C1+G1=T2+A2+G2+C2=1/2(A+G+C+T);

A1+T1=A2+T2=A3+U3=1/2(A+T);C1+G1=C2+G2=C3+G3=1/2(G+C);

③a.DNA單、雙鏈配對(duì)堿基之和比((A+T)/(C+G)表示DNA分子的特異性):

若(A1+T1)/(C1+G1)=M,則(A2+T2)/(C2+G2)=M,(A+T)/(C+G)=M

b.DNA單、雙鏈非配對(duì)堿基之和比:

若(A1+G1)/(C1+T1)=N,則(A2+G2)/(C2+T2)=1/N;(A+G)/(C+T)=1;若(A1+C1)/(G1+T1)=N,則(A2+C2)/(G2+T2)=1/N;(A+C)/(G+T)=1.

④兩條單鏈、雙鏈間堿基含量的關(guān)系:

2A%=2T%=(A+T)%=(A1+T1)%=(A2+T2)%=(A3+U3)%DNA復(fù)制時(shí)分三步:解旋,配對(duì),復(fù)旋.

復(fù)制時(shí)遵循堿基互補(bǔ)配對(duì)原則,A與T之間以雙鍵連接,C與G之間以三鍵連接.

DNA復(fù)制是半保留復(fù)制,一個(gè)DNA復(fù)制N代后產(chǎn)生的子代DNA數(shù)目是2的N次方個(gè).含有原來(lái)母鏈的DNA有2個(gè).

2C%=2G%=(G+C)%=(C1+G1)%=(C2+G2)%=(C3+G3)%

另求關(guān)于1個(gè)全部被氮15標(biāo)記的DNA復(fù)制n代后關(guān)于DNA的各種分子數(shù)計(jì)算公式,謝謝

①親代有1條DNA,n次復(fù)制后,有2^n條DNA,去除親代1條,復(fù)制后DNA多出了2^n-1條所以,需要消耗的游離的脫氧核糖核苷酸為m×(2^n-1)個(gè)②由半保留復(fù)制原理可知:復(fù)制n代后,共有2的n次方個(gè)DNA分子,這些分子中共有m乘2的n次方個(gè)該種脫氧核苷酸,其中包括最保留下來(lái)的m個(gè)。因此,經(jīng)過(guò)經(jīng)過(guò)n代復(fù)制共消耗游離的脫氧核苷酸{m乘(2的n次方-1)}個(gè).由于第n次復(fù)制為第n-1代到第n代,DNA分子數(shù)由2的n-1次方個(gè)增加到2的n次方個(gè),增加了2的n-1次方個(gè),因此需該脫氧核苷酸為m×(2^n-1)個(gè)

二、怎樣用實(shí)驗(yàn)原理來(lái)證明dna是半保留復(fù)制

1、在僅以15NH4C1為氮源的培養(yǎng)基里,使大腸桿菌繁殖數(shù)代,將其DNA用重同位素15N標(biāo)記上,然后立即將大腸桿菌轉(zhuǎn)移到14NH4C1培養(yǎng)基中繼續(xù)培養(yǎng),按不同時(shí)間取樣品抽提DNA,采用氯化銫密度梯度離心法分析。

2、結(jié)果表明DNA分子在0代顯示重密度(HH),1代全部為中等密度(HL),2代表現(xiàn)為中等密度(HL)與輕密度(LL)等量。這樣,華森-克里克(Watson-Crick)的半保守復(fù)制模型首先在大腸桿菌得到了分子水平的證明。

3、DNA復(fù)制為一個(gè)邊解旋邊復(fù)制的過(guò)程。復(fù)制開(kāi)始時(shí),DNA分子首先利用細(xì)胞提供的能量,在解旋酶的作用下,把兩條螺旋的雙鏈解開(kāi),這個(gè)過(guò)程叫做解旋。然后,以解開(kāi)的每一段母鏈為模板,以周?chē)h(huán)境中游離的四種脫氧核苷酸為原料,按照堿基互補(bǔ)配對(duì)原則,在有關(guān)酶的作用下,各自合成與母鏈互補(bǔ)的一段子鏈。

4、隨著解旋過(guò)程的進(jìn)行,新合成的子鏈也不斷地延伸,同時(shí),每條子鏈與其對(duì)應(yīng)的母鏈盤(pán)繞成雙螺旋結(jié)構(gòu),從而各形成一個(gè)新的DNA分子。這樣,復(fù)制結(jié)束后,一個(gè)DNA分子就形成了兩個(gè)完全相同的DNA分子。新復(fù)制出的兩個(gè)子代DNA分子,通過(guò)細(xì)胞分裂分配到子細(xì)胞中去。

5、新合成的每個(gè)DNA分子中,都保留了原來(lái)DNA分子中的一條鏈。

6、參考資料來(lái)源:百度百科-米西爾遜-斯塔爾實(shí)驗(yàn)

7、參考資料來(lái)源:百度百科-半保留復(fù)制

三、高中生物必修中,那些實(shí)驗(yàn)使用同位素標(biāo)記法的哪些沒(méi)用

1、同位素標(biāo)記法在高中生物學(xué)中的應(yīng)用總結(jié)

2、同位素標(biāo)記法是利用放射性同位素作為示蹤劑對(duì)研究對(duì)象進(jìn)行標(biāo)記的微量分析方法,生物學(xué)上經(jīng)常使用的同位素是組成原生質(zhì)的主要元素,即H、N、C、S、P和O等的同位素。

3、1.分泌蛋白的合成與分泌(必修1P40簡(jiǎn)答題)

4、20世紀(jì)70年代,科學(xué)家詹姆森等在豚鼠的胰腺細(xì)胞中注射3H標(biāo)記的亮氨酸。3min后被標(biāo)記的亮氨酸出現(xiàn)在附有核糖體的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中;17min后,出現(xiàn)在高爾基體中;117min后,出現(xiàn)在靠近細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)的囊泡中及釋放到細(xì)胞外的分泌物中。由此發(fā)現(xiàn)了分泌蛋白的合成與分泌途徑:核糖體→內(nèi)質(zhì)網(wǎng)→高爾基體→囊泡→細(xì)胞膜→外排。

5、1939年,魯賓和卡門(mén)用18O分別標(biāo)記H2O和CO2,然后進(jìn)行兩組對(duì)比實(shí)驗(yàn):一組提供H2O和C18O2,另一組提供H218O和CO2。在其他條件相同情況下,分析出第一組釋放的氧氣全部為O2,第二組全部為18O2,有力地證明了植物釋放的O2來(lái)自于H2O而不是CO2。

6、20世紀(jì)40年代美國(guó)生物學(xué)家卡爾文等把單細(xì)胞的小球藻短暫暴露在含14C的CO2里,然后把細(xì)胞磨碎,分析14C出現(xiàn)在哪些化合物中。經(jīng)過(guò)10年努力終于探索出了光合作用的“三碳途徑”——卡爾文循環(huán)。為此,卡爾文榮獲“諾貝爾獎(jiǎng)”。

7、1952年,赫爾希和蔡斯以T2噬菌體為實(shí)驗(yàn)材料,用35S、32P分別標(biāo)記噬菌

8、體的蛋白質(zhì)外殼和DNA,再讓被35S、32P分別標(biāo)記的兩種噬菌體去侵染大腸桿菌,

9、經(jīng)離心處理后,分析放射性物質(zhì)的存在場(chǎng)所。此實(shí)驗(yàn)有力證明了DNA是遺傳物質(zhì)。

10、1957年,美國(guó)科學(xué)家梅塞爾森和斯坦?fàn)栍煤?5N的培養(yǎng)基培養(yǎng)大腸桿菌,使之變成“重”細(xì)菌,再把它放在含14N的培養(yǎng)基中繼續(xù)培養(yǎng)。在不同時(shí)間取樣,并提取DNA進(jìn)行密度梯度離心,根據(jù)輕重鏈浮力等的不同,就分出新生鏈和母鏈,這就證實(shí)了DNA復(fù)制的半保留性。

11、在目的基因的檢測(cè)與鑒定中,采用了DNA分子雜交技術(shù)。將轉(zhuǎn)基因生物的基因組DNA提取出來(lái),在含有目的基因的DNA片段上用放射性同位素作標(biāo)記,以此為探針使之與基因組DNA雜交,如果顯示出雜交帶,就表明目的基因已導(dǎo)入受體細(xì)胞中。

12、另外,還可采用同樣方法檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA,不同的是從轉(zhuǎn)基因生物中提取的是mRNA。

13、基因診斷是用放射性同位素(如32

14、P)、熒光分子等標(biāo)記的DNA分子作探針,依據(jù)DNA分子雜交原理,鑒定被檢測(cè)樣本上的遺傳信息,從而達(dá)到檢測(cè)疾病的目的。

15、另外,還可以用在植物有機(jī)物的運(yùn)輸研究過(guò)程中。

16、示蹤原子不僅用于科學(xué)研究,還用于疾病的診斷和治療。例如,射線能破壞甲狀腺細(xì)胞,使甲狀腺腫大得到緩解。因此,碘的放射性同位素就可用于治療甲狀腺腫大。

文章分享結(jié)束,同位素標(biāo)記法證明dna復(fù)制為半保留性和怎樣用實(shí)驗(yàn)原理來(lái)證明dna是半保留復(fù)制的答案你都知道了嗎?歡迎再次光臨本站哦!


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